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實驗室發酵罐的構成及實驗步驟

作者:發酵罐 時間:2018-03-05 11:25
發酵罐是由3條線路構成的,一個是空氣的進出(不進入夾層),蒸汽的進出(隻在對空氣過濾器滅菌時才進入罐體,是 從夾層的上進下出的),水的進出(進入夾層內,從下進上出。當開始發酵時,水路會形成一個循環,由溫度感應器對其進行調節,保 信息摘要:
實驗室 發酵罐 的構成及實驗步驟 一、實驗原理 發酵罐是由3條線路構成的,一個是空氣的進出(不進入夾層),蒸汽的進出(隻在對空氣過濾器滅菌時才進入罐體,是 從夾層的上進下出的),水的進出(進入夾層內,從下進上出

實驗室發酵罐的構成及實驗步驟

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實驗室發酵罐的構成及實驗步驟

實驗室發酵罐的構成及實驗步驟

 

一、實驗原理

發酵罐是由3條線路構成的,一個是空氣的進出(不進入夾層),蒸汽的進出(隻在對空氣過濾器滅菌時才進入罐體,是 從夾層的上進下出的),水的進出(進入夾層內,從下進上出。當開始發酵時,水路會形成一個循環,由溫度感應器對其進行調節,保證水的溫度在發酵所需溫度範圍內)。

二、實驗設備

AG亚游集团實驗室所用的發酵罐是由蒸汽發生器、空氣壓縮機、儲氣罐和發酵罐和控製麵板組成的。

1.         蒸汽發生器:黃燈亮代表需要進水,進水好後紅燈亮,自動開始加熱。其背後有一閥門,是控製蒸汽流出的開關,常開。

2.         空氣壓縮機:摁下紅色按鈕起開始向儲氣罐內通入空氣

3.         儲氣罐:由於實驗器材老化,處於安全考慮,壓力控製在2Kg(0.2Mpa),超過這一壓力則要關閉空氣壓縮機。儲氣罐底部有一出氣的安全閥,此閥是常開的。

4.         發酵罐:發酵罐上連有電極,當要打開發酵罐時要先將其拆下,避免損壞。在旋緊發酵罐時要對角線旋緊旋鈕。

不鏽鋼錐形發酵罐

三、實驗步驟

²  實驗前的預備工作

1.         清洗發酵罐:將發酵罐的電極拆下,旋鈕選出,對發酵罐進行清洗

2.         檢查氣密性

1)        將閥門F14(發酵罐的出氣閥)與發酵罐夾層的出水閥打開,在實驗過程中這是一直要打開的

2)        打開電源總閘,打開蒸汽發生器水龍頭,將水通入蒸汽發生器內,紅燈亮時關閉水龍頭

3)        將空氣壓縮機的開關打開,向儲氣罐內通入空氣,當壓力到2Kg(0.2Mpa)時,關閉空壓機。

4)        通過進樣孔向發酵罐內通入一定量的去離子水,使其沒過空氣管口。

5)        先打開發酵罐的進氣閥門F11、F13,再打開儲氣罐連接發酵罐的管道閥門.

6)        當罐內壓力上升到0.05MPa時,關閉F14,F13,將發酵罐底部取樣旋鈕旋至最下放方以防漏氣,此時罐內壓力在30min內保持不變則氣密性良好。

3.         發酵罐的滅菌

空消:

1.         30min後,打開F14,F13閥門,調節大小使其穩定在0.03MPa

2.         在打開蒸汽發生器的閥門前,先將發酵罐的蒸汽出口閥門打開

3.         打開蒸汽發生器的閥門與發酵罐的進氣閥門,關閉進氣閥F13以防倒吸,當溫度上升到121℃時,保持30min,注意調節F14,使罐內壓力維持在一定的壓力值(過大會有危險,過小溫度難以上升)此時發酵的前期準備工作已就緒,開始準備發酵。

2、  30min後,泄壓;關閉蒸汽發生器的閥門與發酵罐蒸汽進入閥門,打開F13進空氣的閥門(防止罐體變形)

1.          

²  發酵步驟

(一)  實消

1.         冷卻發酵罐(防止過熱物料噴出),從加樣孔內通入物料(物料要先全部溶解)於6L左右,打開攪拌器;

2.         打開蒸汽發生器的閥門與發酵罐蒸汽進入閥門,關閉F13以防倒吸;

3.         當罐內溫度上升到90℃時,停止攪拌以防電極被燒壞;

4.         對空氣過濾器滅菌;當溫度上升到100℃時,打開空氣過濾器的閥門F3,關閉進氣閥F11,再打開進氣閥F13,對空氣過濾器滅菌15min。

5.         實消;15min後,關閉空氣過濾器的閥門F3與進氣閥F13,打開F11,當溫度上升到121℃時,保持30min,進行實消的滅菌。

6.         30min後,泄壓,打開F13進氣閥,再對罐體進行降溫;關閉所有的蒸汽進口閥,打開水龍頭,打開冷凝水的進出口閥(先出後進)。

(二)  接種

1.         對罐體進行降溫,冷卻到30℃左右;

2.         接種;在進樣孔旁圍上一圈脫脂棉,倒上酒精,點火對加樣孔進行滅菌,滅菌後,由進樣孔進行接種。

(三)  開始發酵

1.         設置參數,溫度設置在37℃,打開循環水路的閥門,水龍頭關小,開始發酵;

2.         取樣;沒兩小時取樣一次,取樣前要相對管道進行滅菌,打開取樣器的閥門,打開蒸汽進口閥,對管道滅菌15min,在冷卻5min後方可取樣,每次取樣前都要對管道進行滅菌。將出樣旋鈕旋上,打開取樣器的閥門,用離心管或試管接樣,冷卻後放入冰箱,每12h鏡檢一次,48h後統一檢測OD值。

(四)  發酵結束

1.         發酵結束後,將樣品全部放出;

2.         關閉進水閥,對夾套進行排水,最後關閉除出水閥外的所有閥門;

3.         將發酵罐電極拆下,清洗發酵罐。

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